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了解一下去垢剂在蛋白提取中的应用吧
  去垢剂亦有称为清洁剂,主要成分是表面活性剂(部分场合即特指表面活性剂,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多),根据实际需求有时也会包括研磨剂,pH调节剂,酸,硬水软化剂,氧化剂,酶,发泡剂,增白剂、稀释剂等多种成分。
 
  下面让我们了解一下去垢剂在蛋白提取中的应用吧
 
  蛋白质变性剂的作用是破坏蛋白质的次级键,如氢键、盐键和疏水力,引起天然构象的解体;它们并不破坏共价键,如肽键和二硫键,故不涉及一级结构的改变。
 
  变性剂有溶解型和沉淀型两类,SDS、尿素和胍盐是有效的溶解型变性剂,而甲醇、异戊醇是有效的沉淀变性剂。
 
  一般而言,变性剂应用时常大大过量,破坏氢键的变性剂用量至少两倍于氨基酸的克分子数,如1克蛋白质可可结合1.4g。
 
  SDS溶于水可达25%,对温度敏感,W/V贮存液为方便。需要注意的是SDS的钾盐是不溶性的,所以SDS溶液中要避免混入钾盐。
 
  尿素极易溶于水,可达10mol/L,在8mol/L以上要注意温度以防止沉淀。尿素在水中缓慢分解形成氨及高度活性的氰酸离子,故要防止高温。 过氯酸(TCA,PCA)都是*的沉淀剂,能沉淀蛋白质和核酸,前者应用更为广泛。
 
  去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。
 
  去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。
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