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FerroOrange 亚铁离子荧光探针

FerroOrange 亚铁离子荧光探针

简要描述:

FerroOrange 亚铁离子荧光探针FerroOrange是一种特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+)的荧光探针,定位在内质网(ER)。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色荧光产物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,图1. FerroOrange的光谱特征)。

产品时间:2024-05-16

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FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针


产品标签

FeRhoNox-1;FerroOrange;Labile ferrous ion不稳定铁(II)离子;Fe2+荧光探针;Ferroptosis铁死亡;C11 BODIPY 581/591脂质过氧化探针;


产品信息

产品名称

产品编号               

规格                  

价格(元)         

FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针   

MX4559-24UG

24μg

2480

FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针

MX4559-48UG

2×24μg

4580


产品描述

FerroOrange是一种特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+)的荧光探针,定位在内质网(ER)。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色荧光产物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,图1. FerroOrange的光谱特征)。铁(III)离子(Fe3+)或其它除铁离子以外的二价金属离子都不会使其荧光增强(见图2. FerroOrange的反应特异性)。FerroOrange也不会与铁蛋白和其它物质中的螯合铁反应。FerroOrange具强细胞膜渗透性和低细胞毒性(见附图3. FerroOrange的细胞毒性测定),非常适用于活细胞成像。

FerroOrange 亚铁离子荧光探针

图1. FerroOrange的光谱特征。FerroOrange在0.05M HEPES buffer, pH 7.4内的吸收光谱(左)和荧光光谱。最大吸收波长在542nm,最大荧光光谱在572nm。一旦与Fe2+反应,荧光强度显著增加。

FerroOrange 亚铁离子荧光探针

图2. FerroOrange的反应特异性。FerroOrange与各种金属离子(左),活性氧或还原剂(右)的反应性。仅当与Fe2+反应,FerroOrange呈强荧光。


保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。


注意事项

  1. FerroOrange主要定位在内质网(见附图4),但也可能检测细胞质池内的Fe2+,目前针对这一点未做明确评估。

  2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


使用说明

1. 需要自行准备的材料

1.1 细胞培养级DMSO(比如:MS4601A-100ML)

1.2 合适的清洗和观察缓冲液(比如:PBS, pH 7.4;HBSS;无血清培养基等)。不要含酚红。


2. 探针准备

2.1 从冰箱取出FerroOrange,置于室温至少30min,将其置于微量离心机内低速离心。将瓶内的粉末离心到管底后,再开盖。

2.2 往一管FerroOrange(24μg)内加入35μl高质量DMSO,用枪反复吹吸5次或以上,使其wan全溶解即得到1mMFerroOrange储存液。若单次不能用完储存液,请根据单次用量分装,置于-20℃避光保存,一个月内使用。

2.3 于正式实验前,用中性缓冲液或细胞培养基来稀释1mM FerroOrange储存液到所需工作浓度(比如:1μM),工作液需现配现用,尽快用完。【注意:酸性溶液会氧化FerroOrange,严重影响探针的效率】。


3. 染色步骤

3.1于荧光培养皿中接种细胞,于37℃,5% CO2培养箱中孵育过夜。

3.2 染色步骤


4. 荧光检测

对于荧光显微镜:通用的G激发滤片比如Cy3检测用的滤片。

对于激光显微镜和流式细胞仪:532nm,514nm或561nm激光器用于激发。实在没有,亦可用488nm激光器。发射波长为572nm。


相关产品

货号

名称

规格                

MX5211-1MG      

C11 BODIPY 581/591 脂质过氧化荧光探针

1mg

MX4558-50UG

FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针

50μg

MX4559-24UG

FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针

24μg

MX5401-1MG

MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator 线粒体脂质过氧化探针 

1mg

MX5402-1MG

BODIPY 558/568 C12脂质转运荧光探针

1mg


附录 FerroOrange的细胞毒性

FerroOrange 亚铁离子荧光探针

图3.各种浓度FerroOrange对HepG2细胞的代谢活性。不同浓度的FerroOrange(以1% DMSO作为共溶剂)加入细胞内,培养24h后,用MTT法测定代谢活性。(n=3)

 

附录FerroOrange的胞内定位

FerroOrange 亚铁离子荧光探针

图4.FerroOrange的胞内定位。将FerroOrange(红色), ER Tracker(绿色)和Hoechist 3342(蓝色)加载进入HT-1080细胞并成像观察。FerroOrange主要定位在内质网。Bar:10 μm。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

 

 

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