活细胞线粒体荧光探针

PKmito RED (PKMR) 活细胞线粒体荧光探针

产品信息

产品描述

PKmito RED (PKMR)是北京大学陈知行课题组研发的PKmitoTM系列染料中的成员之一，兼具明亮的荧光、非常低的化学毒性和光学毒性，以及优秀的线粒体定位能力的特征。

PKmito RED (PKMR)高特异性标记活细胞的线粒体。由于胞内分子三线态淬灭剂COT基团的存在，赋予该探针极其低的光学毒性，从而使其适合用于线粒体的长时间示踪。PKMR聚集在线粒体内膜（IM），特别适合通过STED超分辨光学显微镜（660nm损耗激光）对线粒体嵴结构和动力学进行成像观察。PKMR的最大吸收和发射波长分别是：549nm和569nm，能用标准的TMR或Cy3滤片成像，也能用于宽场、共聚焦、SIM或STED显微镜。

PKmito RED (PKMR)的重要特征：

j Ab：549nm；Em：569nm；

k 适用于活细胞线粒体的长期成像；

l 不适合用于固定细胞的线粒体染色；

m 兼容于宽场、共聚焦、SIM或STED显微镜。

产品特性

保存与运输方法

保存：≤-20°C避光干燥保存，收到货至少12个月有效。 

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 本品量非常少，使用前低速离心后直接加适当溶剂溶解使用，切勿分装称量。

2） 整个染色过程中需注意避光。

3） PKmitoTM产品的商标持有者是Genvivo Biotech Co., Ltd.

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 储存液的配制

j 初次使用，请将低温保存的PKMR（固体）置于室温回温至少20min，低速离心3~5min。

k 于超净台内开盖，直接往管内加入适量高质量的无水DMSO使其溶解，配制成250µM（1000×）母液。本染料可以反复冻融，因此，不建议分装。每次使用完毕后，请将1000×母液置于≤-20°C 以下避光冻存。但务必要注意，每次开盖取样前，不管是固体还是母液，都必须让其恢复到室温。在正确的溶解和储存和使用习惯下，母液至少能稳定保存3个月。

a）MX4327-5nmol：往管内加入20µl无水DMSO，使其溶解且充分混匀，得到250µM（1000×）母液；

b）MX4327-25nmol：往管内加入100µl无水DMSO，使其溶解且充分混匀，得到250µM（1000×）母液；

l 如需长期保存，可在产品初次开封后，用DMF或任意比例的乙腈水溶液溶解产品后分装，真空干燥、冻干或氮气吹干后，即可长期保存（至少一年）。

2. 染色工作液的配制

于实验前，用37℃预热的常用细胞培养基（比如：DMEM+10% FBS）将适量的250µM母液稀释到250nM（1×）工作液，简单涡旋或用枪吹匀后备用。染色工作液必须新鲜配制，久置后可能导致部分染料降解或沉淀。染色工作液不可重复使用。

3. 细胞准备和染色

j 按常规方法，在爬片上、玻底培养皿或玻底多孔板中接种和培养细胞。

k 当细胞生长到所需密度，用新鲜配制的染色工作液替换旧的培养基，确保染色工作液覆盖所有的细胞。l 于37℃、5% CO2的培养箱中避光孵育15~30min。

m 用37℃预热的培养基清洗细胞1~2次，之后更换成不含探针的培养基，即可用于荧光成像。

4. 细胞成像

PKMR染色后的细胞最好用标准的Cy3滤片设置来进行成像。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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