低熔点琼脂糖核酸纯化与电泳

Low Melting Point Agarose 低熔点琼脂糖

产品标签

Agarose 琼脂糖；低熔点琼脂糖；高分辨率琼脂糖；GelRed；DuRed；GelGreen；MKRed；琼脂糖凝胶电泳； 

产品信息

产品描述

琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，琼脂糖可用于①电泳（Electrophoresis）：包括核酸分离，免疫电泳（IEP）和等电聚焦（IEF）在内的各种电泳实验；②免疫扩散（Immunodiffusion）：琼脂糖用作固体凝胶基质让抗体或抗原分④⑤子扩散得以测试交叉反应；③固体培养基基质：组织培养中琼脂糖用于制备细胞的凝胶平板或涂层；用于制备细菌或植物细胞生长所需的固体或半固体培养基；在空斑实验中用于覆盖病毒感染细胞；④凝胶色谱、亲和色谱和离子交换色谱；⑤蛋白结晶的生长等；

琼脂糖的基本参数，包括：

1）硫酸盐含量（sulfate content）— —纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；更低硫酸盐含量更适合用于DNA电泳。

2）凝胶强度（gel strength）— —施加于凝胶使之断裂的外力；凝胶强度取决于凝胶浓度。

3）胶凝点（Gel point）— —水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。

4）电渗（Electroendosmosis, EEO）— —液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

本品是低熔点琼脂糖，经特殊的性质改造制备而得，具更细致的凝胶结构和更高的分辨率，适用于DNA/RNA片段分离，以及电泳后核酸片段的回收（65℃以下凝胶融化）。37℃溶液保持流动状态，适用于凝胶内的操作实验、组织培养、病毒空斑实验等。

产品特性

保存与运输方法

保存：室温干燥密封保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

凝胶配制

1.配制适量和合适浓度的电泳及制胶用的缓冲液。【注意】：电泳缓冲液和制胶用缓冲液必须保持一致。

2. 根据制胶量及所需凝胶浓度，往加有一定量电泳缓冲液的三角锥瓶内，加入称量好的琼脂糖粉。

【注意】：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。

3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖。设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾~30s，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1min，或直至琼脂糖完quan溶解。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。【注意】：必须保证琼脂糖完quan溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入核酸电泳染料，比如：溴化乙锭（EB，MF0756-1G）或MKRed无毒环保核酸染料（MF0754-500UL），充分混匀。【注意】：EB是一种致癌物质。使用含有EB的溶液时，请戴用手套。

5.将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3~5mm之间。

6.室温使胶凝固（约30min~1h），然后放置于电泳槽中进行电泳。【注意】：凝胶若不立即使用，请用保鲜膜将凝胶包好后在放4℃保存，一般可保存2～5天。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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附表I琼脂糖凝胶浓度与DNA分离范围

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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