重组霍乱毒素B亚基 血清
简要描述：
重组霍乱毒素B亚基 血清霍乱毒素（Cholera toxin，CTX）是霍乱弧菌产生的毒力因子，会引起严重腹泻以及人体脱水。CTX属于AB5亚基家族。天然六聚体蛋白含两个亚基，分子量约85kDa
产品时间：2025-06-04
打印当前页Recombinant Cholera Toxin B subunit, CF647-conjugated
重组霍乱毒素B亚基（CF647标记，深红色荧光）
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
重组霍乱毒素B亚基（CF647标记，深红色荧光） | MX0942-100UG | 100μg | 4786 |
背景描述
霍乱毒素（Cholera toxin，CTX）是霍乱弧菌产生的毒力因子，会引起严重腹泻以及人体脱水。CTX属于AB5亚基家族。天然六聚体蛋白含两个亚基，分子量约85kDa。由一个A亚基（约27.2kDa）和五个B亚基（约11.6kDa/亚基）组成，B亚基以五聚体环的方式排列，呈明显的五度对称，负责毒素识别并吸附细胞表面的神经jie苷脂GM1。
A亚基催化刺激性G蛋白α亚基（Gαs）的ADP核糖基化，降低GTPase活性和活化α亚基。Gαs的活化引起腺苷酸环化酶（AC）活性增加，进而促使cAMP水平提高。A亚基还能ADP核糖基化视杆细胞外节膜盘的转运蛋白，使得GTPase失活。霍乱毒素还是一种高效的黏膜疫苗佐剂，通过抑制IL-12生产来诱导2型辅助性T细胞的免疫应答。
霍乱毒素B亚基（CTB）对细胞无毒，本质上不含腺苷酸环化酶活性。CTB通过结合神经jie苷脂GM1附着到细胞上，是小胶质细胞的良好标记物（这类细胞表面富含神经jie苷脂GM1），但不适合标记少突胶质细胞或星形胶质细胞。CTB是利用组化方法研究轴突运输的优秀示踪剂。CTB也是常用的脂筏标记物，脂筏是富含胆gu醇和鞘脂的膜微区，在细胞信号转导和蛋白质运输中发挥重要作用。
产品描述
本品是偶联上深红色荧光素-CF647（Ex/Em=650/665 nm）的重组霍乱毒素B亚基（rCTB），即Recombinant Cholera Toxin B subunit, CF647-conjugated，简写：CF647 conjugated- rCTB，适用于神经学研究中的束路追踪，靶向神经jie苷脂GM1）结合和逆行运输。也可在活细胞或固定细胞成像中用作脂筏标记物和内吞示踪剂。
保存与运输方法
保存：-20℃保存，至少6个月有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 本品以冻干粉形式提供，由于量比较少，初次使用前需置于室温回温至少30min，低速离心后，再开盖直接往瓶内加入合适的溶剂进行溶解。
2） CF系列荧光染料是Biotium的注册商标，Alexa Fluor和DyLight系列染料是Thermo Fisher的注册商标，Cy系列染料是Cytiva的注册商标。
3） 本品仅供科研用途，绝不可以用于临床或诊疗用途。
4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
以下是用荧光标记的rCTB对细胞进行标记的实验流程。对于其他的应用（比如：神经示踪），请根据应用查找相应的文献作为参考。
一、 自行准备材料
1.1 磷酸盐缓冲液（PBS）（比如：MS3552-500ML）
1.2 牛血清白蛋白（BSA）（比如：MP6101-5G）
1.3 HBSS（比如：MS3505-500ML）
1.4 4%多聚甲醛（比如：MM1504-500ML）
1.5 【可选】Hoehcst 33342（比如：MX4203-10MG，MX4203-1ML，MX4204-10ML）
二、 染料准备
重溶：将低温保存的CF647 conjugated- rCTB（规格：100μg）置于室温回温至少30min，低速离心3-5min，将粉末离心至管底。直接往瓶子加入100μl无菌水或1×PBS使其充分溶解，即得到1mg/ml的母液。
保存：新鲜制备的CF647 conjugated- rCTB（1mg/ml）置于+4℃避光保存，3个月稳定。亦可根据单次用量分装后，置于-20℃避光保存，6个月稳定，避免反复冻融。
三、 活细胞的表面标记
3.1用4℃预冷的HBSS+0.5% BSA清洗细胞一次；
3.2用4℃预冷的HBSS+0.5% BSA稀释CF647 conjugated- rCTB（1mg/ml）到工作浓度：400ng/ml-1μg/ml。
3.3吸走细胞内的缓冲液，加入新鲜配置的CF647 conjugated- rCTB染色工作液。+4℃避光孵育30min。
3.4用4℃预冷的HBSS+0.5% BSA清洗细胞三次；
3.5用4%多聚甲醛固定细胞，+4℃避光固定15min。
3.6用PBS清洗细胞二次，之后进行成像或接着做后续的染色。【注：根据实验需求，考虑是否加入核复染剂-Hoechst 33342等】
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MS3505-500ML | 1×Hanks平衡yan溶液（含钙镁，无酚红） | 500ml |
MP6101-5G | BSA, Standard Grade牛血清白蛋白（标准级别） | 5g |
附录I几款CF染料的光谱特征
CF488A | CF568 | CF594 | CF640R | CF647 | CF680R | |
最大Abs/Em | 490/515 nm | 562/584 nm | 593/614 nm | 642/662 nm | 650/665 nm | 680/701 nm |
摩尔吸光系数 | 70,000 | 100,000 | 115,000 | 105,000 | 240,000 | 140,000 |
分子量 | ~914 | ~714 | ~730 | ~832 | ~836 | ~912 |
激发激光线 | 488nm | 532 nm or 568 nm | 561 to 568 nm | 633, 635 or 640 nm | 633 or 635 nm | 680 or 685 nm |
可替代染料 | Alexa Fluor 488 Cy2 DyLight 488 FITC | Alexa Fluor 568 ATTO 565 Rhodamine Red | Alexa Fluor594 Texas Red DyLight 594 | Alexa Fluor 647, ATTO 647N, Cy5, DyLight 649 | Alexa Fluor647 Cy5 DyLight 649 | Alexa Fluor680 Cy5.5 DyLight 680 IRDye 680LT |
应用 | 荧光显微镜 共聚焦显微镜 流式细胞仪 超分辨率成像（STED,TIRF,STORM,SIM, 2-Photon） | 共聚焦显微镜 单分子成像 超分辨率成像（SIM, TIRF, STED，STORM） | 荧光显微镜 共聚焦显微镜 流式细胞仪 超分辨率成像（STED，2-Photon） | 共聚焦显微镜 单分子成像 超分辨率成像（STED，SIM,2-Photon，TIRF,FLImP） | 荧光显微镜 共聚焦显微镜 流式细胞仪 超分辨率成像（STORM） | 小动物成像仪 超分辨率成像（STORM、3D） |
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