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Coelenterazine Native 天然腔肠素

Coelenterazine Native 天然腔肠素

简要描述:

Coelenterazine Native 天然腔肠素(CTZ-Native)是自然界中存在较丰富的一种腔肠素,也是目前应用较普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO)的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。

产品时间:2024-03-20

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Coelenterazine Native 天然腔肠素

产品关键词:

Coelenterazine (CTZ) 天然腔肠素;海肾荧光素酶(Rluc分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc;萤火虫荧光素酶(Fluc);In vivo bioluminescence imaging 活体动物体内成像技术;CAS NO50909-86-9

产品信息

产品名称

产品编号  

规格                

价格(元)      

Coelenterazine Native 天然腔肠素       

MX4606-500UG     

500μg

598

Coelenterazine Native 天然腔肠素

MX4606-1MG

2×500μg

1028

Coelenterazine Native 天然腔肠素

MX4606-5MG-A

10×500μg

4368

Coelenterazine Native 天然腔肠素

MX4606-5MG-B

5mg

3758

Coelenterazine Native 天然腔肠素

MX4606-10MG

10mg

6258

【温馨提示】:见我司懋康生物(maokangbio)提供的活体成像底物-腔肠素及衍生物产品专题。

产品描述

腔肠素(Coelenterazine)是在水生生物中发现的一种发光基团(luminophore),是许多荧光素酶的作用底物,包括海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜锚定荧光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和薮枝虫荧光素酶(Obelia luciferase),和发光蛋白包括水母发光蛋白(Aequorin)的构成之一。其作用原理是以腔肠素为底物的荧光素酶,在含分子氧的条件下,氧化腔肠素产生高能量的中间产物,在此过程发射蓝色光,光波长在450~480nm【见图1。而甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶(FLuc)系统不同,其在含分子氧的条件下,还需要ATPMg2+的存在才能同时发光,光波长在550-570nm。正由于生物发光信号和底物的差异,RLuc常常与FLuc联合用于多重转录报告基因研究,或用作Fluc系统内萤火虫荧光素酶转染的内参。腔肠素应用甚是广泛,包括:1)活细胞或组织的钙离子检测;2)细胞或组织的超氧化物和过氧亚硝基阴离子(活性氧,ROS)化学发光检测;3)基因报告基因检测;4)动物活体检测;5ELISA和生物发光共振能量转移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)药物高通量筛选(HTS);


1. 海肾荧光素酶(Rluc)催腔肠素发光的反应流程

天然腔肠素(Coelenterazine NativeCTZ-Native)是自然界中存在丰富的一种腔肠素,也是目前应用普遍的一种标准底物。不仅是脱辅基水母发光蛋白(APO的底物,也是海肾荧光素酶(Rluc)和分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)等荧光素酶的作用底物。前者用于检测钙离子浓度,后者用作荧光素酶的报告基因检测系统。还可用于生物共振能量转移BRET,细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)的化学发光检测等

产品特性

1)   CAS NO55779-48-1

2)   化学名:8-benzyl-6-(4-hydroxyphenyl)-2-[(4-hydroxyphenyl)methyl] -7H-imidazo [1,2-a]pyrazin-3-one

3)   同义名:Coelenterazine, nativ; native Coelenterazine; Coelenterazine free base; native-CTZ; 腔肠素游离酸;

4)   分子式:C26H21N3O

5)   分子量:423.46 g/mol

6)   纯度:>95%

7)   外观:黄色至棕黄色结晶性粉末

8)   溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO

9)   化学结构式:

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、  腔肠素工作液制备

【有关腔肠素溶解的注意事项】:

1)   腔肠素溶于甲醇或乙醇,不可溶于DMSO。腔肠素的水溶性相对比较低,一般情况需先将腔肠素溶于酸化的醇类溶剂配成相对高浓度的母液,然后再用水溶性缓冲液稀释到需要的工作浓度,现配现用。

2)   腔肠素在溶液中的稳定性比较低,号于正式实验前才配制溶液(包括高浓度母液)。但若实际要求,必须保存母液,目前来说稳定的溶剂是丙二醇,往内加入少量L-抗坏血酸,β-巯基乙醇,DTTDTE,或少量HCl能维持其还原态。不过,还原剂可能会减低氧化腔肠素(氧化为Coelenteramide)的动力学速率。也有可能破坏荧光素酶活性。而冻存在醇类溶剂中可能引起腔肠素沉淀,实际取决于溶液浓度。当然,可通过加热50-60℃,使得沉淀重新溶解。必须确保无可见沉淀,或在实验前(特别是活体动物实验)离心去沉淀。

1.1    腔肠素母液制备

1.2    腔肠素工作液制备

二、  操作方法

2.1 体外生物发光

2.2 体内动物成像

【注意】:腔肠素的注射剂量可能根据动物类型、品种、注射方式以及报告基因种类有所差异。加的注射剂量请自行摸索或参考文献来做。

对于海肾荧光素酶报告基因系统,通过腹腔(IP)或静脉注射(IV)按照25-100μg/只小鼠能得到良好结果。对于分泌型膜锚定荧光素酶(Gluc)报告基因系统,由于分泌型膜锚定荧光素酶代谢活性增加,相对来说需要更高量的腔肠素。文献(Tannous BA. Gaussia luciferase reporter assay for monitoring of biological processes in culture and in vivo.Nat Protoc.2009;4(4):582-591.)提到,当用静脉注射(IV)按照4mg/kg体重给药能得到良好结果。

a)根据自身实验室条件选择适当方法麻醉动物,视情况决定是否去皮(通常黑色皮毛动物需去皮)。

b)根据实际情况往动物体内注射相应剂量步骤1.2 配制好的腔肠素工作液。比如,对于海参荧光素酶报告基因系统,使用26-gauge针头注射器尾静脉注射100µl 2 mM (~1mg/ml)腔肠素工作液,然后立即对动物进行体内成像检测,以获得峰值信号。

相关产品

货号

名称

规格

MX4606-1MG

Coelenterazine Native 天然腔肠素

2×500μg

MX4607-1MG

Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔肠素

2×500μg

MX4608-1MG

Coelenterazine h 腔肠素h

2×500μg

MX4609-1MG

Injectable h-Coelenterazine 注射用腔肠素h

2×500μg

MX4610-500UG

Coelenterazine 400 a 腔肠素400a

500μg

MX4611-500UG

e-Coelenterazine 腔肠素e

500μg

MX4612-500UG

Coelenterazine f 腔肠素f

500μg

MX4613-250UG

Coelenterazine cp 腔肠素cp

250μg

MX4614-250UG

Coelenterazine hcp 腔肠素hcp

250μg


— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】


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