TSQ 锌离子荧光探针与细胞染色 生化试剂

TSQ锌离子荧光探针（蓝色荧光）

搜索关键词：

Zinquin ethyl ester；TSQ；FluoZin™-3；Zinc indicator锌离子指示剂；CAS：109628-27-5；

订货信息： 

背景需求：

锌（Zinc, Zn）是体内第二丰富的过渡金属，是非常必要的催化、结构和调控离子。锌离子（Zn2+）参与稳态、免疫反应、氧化应激、凋亡和衰老等生理过程。锌被指出能用作突触前神经元的一种保守型神经递质，以及用作一种跨膜信号贯穿突触前神经元。异常的锌代谢与许多神经性疾病有关联，包括阿尔茨海默病，帕金森病和癫痫（epilepsy）。荧光成像被证明是的体内锌离子监测技术。

产品描述：

TSQ（N-(6-Methoxy-8-Quinolyl)-p-Toluenesulfonamide, CAS NO. 109628-27-5），是一种细胞膜渗透性的锌离子（Zn2+）荧光探针，在含生理浓度的Ca2+和Mg2+体系内选择性结合Zn2+。一旦与Zn2+（0.01-10µM）结合，TSQ荧光明显加强，且荧光发射波长不变。TSQ普遍用于海马苔藓纤维的Zn2+研究。也能用来监测凋亡相关的胞内Zn2+流量变化。

产品特性：

1） CAS NO.：109628-27-5

2） 同义名：Benzenesulfonamide, N-(6-methoxy-8-quinolinyl)-4-methyl; 6-Methoxy-8-p-toluenesulfonamido- quinoline; N-(6-Methoxy-8-quinolinyl)-4-methylbenzenesulfonamide; N-(6-甲氧基-8-喹啉基)-p-对甲苯磺酰胺;

3） 分子式：C17H16N2O3S

4） 分子量：328.4

5） Ex/Em：344/385nm

6） 外观：固体

7） 溶解性：溶于DMSO（≥50mM）、甲醇 

8） 纯度：≥98% (HPLC)

9） 化学结构式：

保存与运输方法

保存：+4ºC避光干燥保存，至少1年有效；-20ºC避光干燥保存，至少2年有效。

运输：室温运输。

注意事项

1） 关于化合物溶解性：产品特性内的“≥"表明溶于标示浓度，但饱和溶解度未知。不同批次化合物的溶解度会有差异。

2） TSQ的荧光对溶剂极性非常敏感。在水性缓冲液中Em= 495 nm (pH, 7.4)。与Zn2+(0.01–10 µM)结合后，荧光增强，但发射波长未发生变化【文献来源：PubMed ID:8582235】。

3） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 储存液的制备

将低温保存的TSQ（固体），置于室温回温至少30min。低速离心后，于超净台内打开盖子，往内加入适量高质量无水DMSO，配制成10-100mM的储存液。一般情况下，为了避免染色体系中有机溶剂（如：DMSO）残留可能引起的细胞毒性，在确保探针完quan溶解的前提下，储存液的浓度至少是工作浓度的1000×。

2. 工作液的制备

于实验前，用合适的生理缓冲液（比如：HHBS，HBSS）或无血清培养基稀释储存液到所需的工作浓度。工作液现配现用！

3. 染色步骤（培养细胞）

染色示例（来自文献，仅做参考）

Ref 1）Kiyohara ACP, Torres DJ, Hagiwara A, Pak J, Rueli RHLH, Shuttleworth CWR and Bellinger FP (2021) Selenoprotein P Regulates Synaptic Zinc and Reduces Tau Phosphorylation. Front. Nutr. 8:683154. doi: 10.3389/fnut.2021.683154

实验步骤：

j大脑两半球的连续冠状冷冻切片（10 μm）盛放在带正电荷的显微镜载玻片上；

k 将切片浸润于含4.5μM TSQ的染色液（稀释于：140 mM sodium barbital and 140 mM sodium acetate buffer (pH 10)）内染色90s，之后用0.1% NaCl清洗；

l 用DAPI滤片来对染色切片成像观察；

染色图片：

Figure 2. Increased hippocampal zinc in SELENOP1 KO mice. (A) Neo-Timm's (Danscher) stain. Free Zn2+ in wildtype and SELENOP1−/− hippocampal neurons from mice injected with sodium selenite is revealed as a reddish-brown to dark brown color relative to the amount of total Zn2+. (B) Representative images from male and female WT and SELENOP1−/− mouse hippocampus, labeled with the fluorescent Zn2+ indicator, TSQ. (C) Quantitation of TSQ fluorescent label indicates higher Zn2+ levels in SELENOP1−/− animals in all observed regions except for hilar region. The average values for each region were normalized to wild type males. N = 6 animals/group, 5–10 slices/animal. Statistical analysis is performed by Student's unpaired t- test or two-way ANOVA with Bonferroni's post-hoc test. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001.

Ref2）Cai J, Zhang Z, Zhou Z, Yang W, Liu Y, Mei F, Zhou G, Wang L. Localization of BEN1-LIKE protein and nuclear degradation during development of metaphloem sieve elements in Triticum aestivum L. Acta Biol Hung. 2015 Mar;66(1):66-79. doi: 10.1556/ABiol.66.2015.1.6. PMID: 25740439.

实验步骤：

j用冷冻切片机制备10 μm切片；

k用TSQ锌离子探针（10 μM）于25℃染5min，之后用ddH2O清洗两次，每次5min；

l 用荧光显微镜观察切片，用UV紫外激发（360~380nm）。对照组用ddH2O替代TSQ染色液。

染色图片：

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