FITC标记双花扁豆凝集素 多肽与蛋白纯化

FITC-DBA (FITC labeled Dolichos Biflorus Agglutinin)

   FITC标记双花扁豆凝集素

产品信息

【温馨提示】：凝集素类产品做切片的染色，如需要做封闭的话，请选择Carbo-Free Blocking Solution (10×)凝集素专用封闭/稀释液（货号：MP6342），避免使用含BSA、血清或酪蛋白的封闭液，否则会引起高背景和非特异性染色。

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产品描述

双花扁豆凝集素（Dolichos biflorus agglutinin,DBA）是一种糖蛋白，分子量约111kDa，由4个大小几乎相同的亚基组成，特异性识别含α-连接‌N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）的碳水化合物。DBA已被用于通过血凝抑制技术确定血型A个体的分泌状态并用于血型分型。DBA还被用作发育中的肾集合管的一般标记物。

本品是FITC标记的双花扁豆凝集素（FITC labeled Dolichos biflorus agglutinin, FITC-DBA）Ex/Em=495/515 nm，亲和纯化所得，基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-20μg/ml。

产品特性

1） 英文同义名：Dolichos biflorus agglutinin, FITC Conjugate; Fluoresceinlabeled Dolichos biflorus agglutinin;

2） 中文同义名：双花扁豆凝集素，FITC标记；双花扁豆（硬皮豆）凝集素,荧光素；

3） 糖类特异性：N-乙酰半乳糖胺（mannose） 

4） 抑制/洗脱糖：200 mM N-乙酰半乳糖胺

5） 外观：溶液（溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5,containing0.1 mM Ca2+, 0.08%sodium azide）

6） 蛋白浓度：2mg/ml

7） Ex/Em：495-500 nm/514-521nm

8） 荧光颜色：绿色

9） 应用：免疫荧光（IF）、糖生物学

10） 血型特异性：A1 >>A2

11） 未偶联凝集素分子量：111 kDa

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，至少1年有效。 

运输：冰袋运输。

注意事项

1） 本品置于2-8℃长期保存可能会产生沉淀，使用前请37℃温育数分钟，之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。

2） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

应用示例

文献来源1）：Michael L, Sweeney DE, Davies JA. The lectin Dolichos biflorus agglutinin is a sensitive indicator of branching morphogenetic activity in the developing mouse metanephric collecting duct system. J Anat. 2007 Jan;210(1):89-97. doi: 10.1111/j.1469-7580.2006.00670.x. PMID: 17229286; PMCID: PMC2100263.

实验对象：小鼠肾原基（kidney rudiment） 

实验目的：利用双花扁豆凝集素（DBA）染色观察生长中输尿管芽和收集管系统。

实验方法：培养后肾原基用甲醇固定，开始放到-20℃（5-15min固定），之后放到室温回温。PBS水化，用抗Laminin（1:100）染色，清洗后，用含10µg/mL FITC-DBA和TRITC抗兔二抗的混合液孵育。之后用荧光显微镜或共聚焦显微镜成像。

实验结果：

Fig 1. Exclusion of DBA staining from the tips of the growing ureteric bud/collecting duct system.(a) Expression of laminin by the ureteric bud of an E11 kidney cultured for 3.5 days, showing the basement membrane in both the stalk and the tip regions; (b) the same kidney stained with DBA, which binds to the stalk but not to the tips. (c,d) The same exclusion of DBA from the tips is seen at 5 days of culture. Scale bar = 100 µm.

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