ALP Stain 碱性磷酸酶染色液改良钙钴法

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori's Method)碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）《促xiao中》

产品信息

【温馨提示】：见我司懋康生物整理的碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP）产品专题。

【温馨提示】：见我司懋康生物整理的碱性磷酸酶活性检测试剂盒（定量检测）产品专题。

【温馨提示】：见我司懋康生物整理的碱性磷酸酶染色检测试剂盒（定性，干细胞检测）产品专题。

产品描述

碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori's Method)）利用的是金属沉淀法来定性检测磷酸酶活性。检测原理是以天然存在的β-甘油磷suan钠为底物，经碱性磷酸酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。

产品组成

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，6个月稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1） ALP染色液、ALP硫化液容易失效，建议开封后根据小份保存，避免重复性开盖使用，影响性能。

2） ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，操作需小心。

3） 样本需新鲜，取材后请立即处理，否则会影响酶活性。

4） 组织固定需在4℃进行，时间不要超过24h，否则酶活性会减弱或消失。

5） 冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。

6） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、实验前准备材料：

1.1蒸馏水，二甲苯或环保脱蜡透明液、甘油明胶

1.2恒温箱或水浴锅、染色缸

二、 冰冻切片染色（仅作参考）

【注意】：对于酶类的染色，一般建议用冰冻切片。

2.1冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2-5min；

2.2 切片入ALP染色液，37℃孵育5-15min；

【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含底物的染色液。】

2.3流水洗2min，入蒸馏水；

2.4入硝酸钴染液，37℃孵育5min；

2.5流水洗5min，入蒸馏水；

2.6准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；

2.7 流水洗10min，入蒸馏水；

2.8 （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；

2.9 冰冻切片用甘油明胶封片剂（比如：MM1409-10ML）封片。

三、染色结果

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