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Deoxyribonuclease  脱氧核糖核酸酶RNA提取

Deoxyribonuclease 脱氧核糖核酸酶RNA提取

简要描述:

Deoxyribonuclease 脱氧核糖核酸酶RNA提取:脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,Z早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是Z主要的来源之一。DNase I以两对二硫键结合的多种糖蛋白混合形式存在。

产品时间:2024-09-11

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                                                             Deoxyribonuclease I (DNase I) 脱氧核糖核酸酶I

 

 

 

本品来自牛胰腺,色谱纯化制备,常用于去除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应,比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

Deoxyribonuclease I (DNase I) 脱氧核糖核酸酶I产品特性

  1)CAS NO:9003-98-9

  2)蛋白纯度:≥80%(biuret),色谱纯化

  3)比活力:≥2000Kunit

  Units/mg protein

  4)活力定义:25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。

  5)激活剂:多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

  6)抑制剂:β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白;并没有特异性抑制DNase I酶活的通用抑制剂,比如柠檬酸盐抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影响Mn2+激活的DNase I。

  7)溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),无色透明溶液

  保存与运输方法

  保存:冻干粉-20℃干燥冻存,至少3年稳定。

  运输:冰袋运输。

  常见问题

  1. 如何溶解DNase I粉末?

  将本品溶解于0.15 M NaCl溶液,可配置成5-10

  mg/ml的储存液,-20℃分装冻存。需要注意:本品储存液即使-20℃分装冻存,一周可能会有<10%活力损失;置于2-8℃,约会有20%活力损失。

  2. 如何将本品活力换算成质量?

  根据本品各批次的比活力和蛋白含量,比如当酶比活力为2000 Kunits/mg,蛋白含量为100%(biuret)也,那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

  3. 使用多大浓度DNase I用来去除溶液内的DNA?

  在含50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2的溶液体系内,加入20-50μg DNase I,并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量仅作参考,具体实验请做适当调整。

 

Deoxyribonuclease I (DNase I) 脱氧核糖核酸酶I描述

  脱氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,缩写DNase I,在大多数细胞和组织中都能发现的一种核酸内切酶,偏好切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物zui小为多聚四核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在条件下,DNase I识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I可水解多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。

的工作范围是pH 7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原来的1/2。

Deoxyribonuclease  脱氧核糖核酸酶RNA提取

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