IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷

IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷/重组蛋白表达诱导物/启动lacZ基因

产品关键词：

IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷；X-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷；β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）；lac repressor 乳糖阻遏物；lacZ Operon lacZ操纵子；Blue-white Screening 蓝白斑筛选；CAS NO.: 367-93-1

基本描述:

IPTG，英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside，中文全名异丙基-β-D-硫代半乳糖苷，CAS NO：367-93-1，诱导细菌lac或tac操纵子调控的基因转录，尤其是水解酶β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）。一旦表达，β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖为单糖。IPTG通常用于β-gal活性分析，当含大肠杆菌来源lacZ基因的载体转染进入细胞后，编码表达β-gal，细胞裂解后，通过催化底物ONPG的颜色反应即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷转乙酰基酶的底物，文献报道还能诱导合成细菌青霉素酶。体内研究IPTG的一个重要优势在于，IPTG不会大肠杆菌所代谢，IPTG浓度和lac p/o控制基因表达都保持稳定。

IPTG诱导lacZ表达的作用机制:

IPTG的主要生理功能:

1）β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）活性检测

β-半乳糖苷酶（β-galactosidase，β-gal）由大肠杆菌lacZ基因编码，是zui常用的一种报告酶，用来研究哺乳动物细胞的基因表达，蛋白-蛋白相互作用，以及标准化转染效率。

检测原理：IPTG诱导lacZ基因表达β-半乳糖苷酶（β-gal），细胞裂解后，体系中加入无色的ONPG（邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷），被β-gal水解为邻硝基苯酚（o-nitrophenol），生成黄色（420nm）。颜色反应的强度与β-gal活性成正比

2）蓝白斑筛选（Blue-white screening）

IPTG普遍用在需要诱导β-gal活性的克隆步骤中，zui为常见的就是和X-gal联合使用进行蓝白斑克隆筛选，或与Magenta-gal联合使用进行红/白斑克隆筛选。

作用机理： 当目的基因插入载体lacZ基因，破坏β-gal表达并阻止其表达。细菌在含X-gal的培养基上生长，β-gal水解此底物生成一不可溶蓝色产物，菌落呈蓝色。若β-gal不能表达，细菌克隆则无法催化X-gal底物，菌落呈白色，以此区分转化重组载体或非重组载体的克隆子。

3）重组蛋白的诱导表达

IPTG也可用于重组蛋白的诱导表达。在这些体系中，待研究蛋白在IPTG诱导型启动子下游编码。IPTG诱导待研究蛋白表达，对细胞裂解后，使用一系列合适方法来纯化蛋白，如His-tag或GST-tag纯化系统（融合相应标签的重组蛋白）。

产品特性

1）CAS NO：367-93-1

2）英文同义名：Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; IPTG;

3）中文同义名：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷；异丙基 β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷；

4）分子式：C₉H₁₈O₅S

5） 分子量：238.30 g/mol

6）  纯度：≥99%（基于干重，HPLC）

7）   外观：白色结晶粉末

8）   杂质：≤0.1% Dioxane（二氧六环）

9）   溶解性：溶于水、乙醇

10）化学结构：

使用方法【详见maokangbio】

1. IPTG储存液配制
2. 蓝白斑筛选方法
3. IPTG诱导重组蛋白的表达

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注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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 IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷

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