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X-Gluc 克隆与表达分析

X-Gluc 克隆与表达分析

简要描述:

X-Gluc 克隆与表达分析,也称为5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronide(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸),是β-葡萄糖苷酶(β-glucuronidase,GUS)的显色底物,X-Gluc 由一种广泛使用的报告基因gusA(uidA)所编码。

产品时间:2021-07-20

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X-Gluc 5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐(X-beta-D- glucuronide CHA salt

——转基因植物zui常用报告基因GUS显色底物,GUS染色定性研究

搜索关键词:β-葡萄糖苷酶(β-glucuronidaseGUS, 蓝色显色底物, 转基因植物GUS表达, GUS染色(定性), 报告基因gusAuidA, 活性检测,  CAS114162-64-0


作用机制:

X-Gluc,也称为5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronide5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸),是β-葡萄糖苷酶(β-glucuronidaseGUS)的显色底物,由一种广泛使用的报告基因gusAuidA)所编码。GUS水解X-Gluc,生成一种无色的葡萄糖醛酸和一种肉眼可见的氯-溴靛蓝(chloro-bromoindigo)深蓝色沉淀。利用这一特性,X-Gluc常用来检测植物细胞和组织中的GUS表达;另外,X-Gluc还能用来检测大肠杆菌引起的感染状况;或检测食物或水源是否受细菌污染。


主要应用:转基因植物报告基因GUS活性检测,X-gluc用作显色底物。

普遍应用优势在于:绝大多数植物细胞内不存在内源性的GUS活性,而且GUS基因表达产物具有检测方法简单、灵敏度高,易于定量及定性分析,能够与其他蛋白质基因融合等优势,因此,GUS基因为植物工程研究中应用zui广泛的报告基因(报道基因)之一。

  1. GUS活性检测(组织化学定位法,定性研究)

GUS催化底物X-gluc在酶活性位点生成深蓝色沉淀,为研究外源基因在植物中表达具体部位研究提供很好的研究手段。且GUS酶和显色产物非常稳定,植物中可以积累。

  1. GUS染色液制备【作为参考,可按照具体实验条件来调整】

  2. GUS定性染色步骤

  1. GUS活性检测(荧光分析法,定量研究)

GUS催化荧光底物MUG 4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸,将其水解为4-MU4-甲基伞型酮)和β-D-葡萄糖醛酸。4-MU中的羟基解离后在365nm的光激发下产生455nm的荧光。此时用荧光分光光度计测定得到的是相对值,因此同时需要用标准物4-MU进行校准。

荧光定量分析GUS活性有两种基本方法:1)在一个时间点测定GUS酶作用产物的总荧光量,需要设定空白对照,以消除内源荧光强度;2)测定一段时间内GUS的动力学过程。在酶反应初始阶段,酶作用产物与时间呈线性关系,而内源性荧光物质的荧光量与时间无线性关系。由此可计算GUS酶活力。GUS酶活性通常以μg MU/min/mg蛋白质。有时也可以用样本的鲜重来表示。


基本特性:

  1. CAS NO114162-64-0

  2. 英文同义名:5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronic acid, cyclohexylammonium salt; X-beta-D- glucuronide CHA salt; X-Gluc CHA Salt; X-glu CHA Salt; X-glcA CHA Salt; BCIG CHA Salt;

  3. 分子式:C14H13BrClNO7 • C6H13N

  4. 分子量:521.79 g/mol

  5. 纯度:>99%HPLC

  6. 外观:白色至类白色结晶性粉末

  7. 溶解性:DMF、甲醇

  8. 化学结构式:




货号

产品名称

规格

价格(元)

货期

MF2004-100MG

X-Gluc 5--4--3-吲哚-β-D-葡糖苷酸环己胺盐

100mg

350

现货

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1800

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1g

1580

1-2

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】


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X-Gluc 克隆与表达分析

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